jueves, 23 de junio de 2016

Transgénicos en Diabetes Mellitus

Transgénicos en Diabetes Mellitus 

La insulina que se administraba a los diabéticos se obtenía de vacas y cerdos, con un efecto muy similar al producido por la variante humana, pero con numerosos problemas de tipo alérgico derivados de las impurezas con las que se obtenía.

Hoy en día se consigue la síntesis de la insulina mediante técnicas biotecnológicas. El procedimiento llevado a cabo fue utilizando las bacterias Escherichia coli como factor en miniatura para producir de forma separada las cadenas A y B de la insulina humana, introduciendo para ello los genes que las codifican en las bacterias mediante un vector pBR322. 

El resultado fue una insulina humana denominada Humulin, más barata de producir, potente y segura, ya que no mostraba los problemas que producían las homólogas animales. Empezó a distribuirse a principios de los años 80 como tratamiento contra la diabetes


No obstante, la investigación no termina aquí. En los últimos años se está consiguiendo que otros organismos genéticamente modificados produzcan insulina humana, con numerosas ventajas. Por ejemplo, se han obtenido vacas transgénicas que producen leche enriquecida en pro-insulina humana, que evitarían tener que purificar la proteína, pues únicamente habría que consumir la leche. Lo mismo ocurre con el cártamo, que se ha modificado para que produzca insulina humana en sus semillas

Ventajas de los transgénicos:

  • Creación de organismos que funcionen como fábricas biológicas, produciendo grandes cantidades de proteínas utilizadas en el tratamie to de enfermedades humanas (insulina).
  • Creación de nuevas proteinas a partir de la combinación de genes 
  • Al modificar determinados genes en animales de laboratorio simulando lo que ocurre en seres humanos cuando aparece una determinada enfermedad, se recorre el camino hacia un mayor conocimiento de ésta y a la obtención de mejores tratamientos.
  • Elaboración de vacunas comestibles, por ejemplo tomates con la vacuna de la hepatitis B,
  • Desarrollo de animales que no dispongan del gen que causa el rechazo de órganos en los tejidos humanos

Desventajas de los transgénicos:

  • Durante el proceso de ingeniería genética se usan genes que otorgan resistencia a antibióticos para identificar las células con la modificación deseada. Existe la preocupación de que dichos genes puedan ser transferidos a microorganismos, originando cepas resistentes a los antibióticos.
  • Los transgénicos pueden causar nuevas alergías 
  • La posibilidad de transferencia de genes al organismo humano.
  • Existe riesgo de que se produzca hibridación.

 
Bibliografía:

sábado, 11 de junio de 2016

ADN recombinante Y Diabetes Mellitus

Es un tipo de ADN  formado por la unión de dos moléculas  de diferente origen.Se distingue entre el ADN recombinante natural, y el ADN recombinante sintético. El primero es el que se genera de manera biológica dentro de los organismos. El ADN se recombina de manera natural mediante procesos como la reproducción sexual, la transformación bacteriana y la infección viral.

El ejemplo de ADN recombinante que se produce en la naturaleza, es la transferencia de plasmidos desde una bacteria a otra.Los plásmidos suelen contener uno o dos genes que les confieren resistencia a antibióticos y permiten seleccionar clones recombinantes. Los plasmidos tienen la capacidad de transferir genes desde un organismo a otro, (usualmente lo podemos ver en bacterias) y típicamente contienen un marcador genético confiriendo un fenotipo el cual puede ser seleccionado a favor o en contra.  
                         
En la actualidad la insulina que se emplea para uso terapéutico es la sintética DNA recombinante similar a la humana. 

Procesos de ingeniería genética pueden producir insulina humana. La insulina humana se coloca en el ADN de un segundo organismo. El organismo huésped se convierte en una fábrica productora de insulina. Las personas con diabetes no producen o utilizan su proteína insulina correctamente. La insulina de las vacas o los cerdos se ha utilizado desde la década de 1900 para tratar la diabetes. Ahora proteína insulina humana puede ser producida en masa a través de procesos de ingeniería genética.
Posteriormente con el uso de la ingeniería genética ha sido posible sintetizar insulina humana, dando lugar a la insulina semisintética (obtenida a partir de insulina porcina por sustitución en la cadena B del aminoácido alanina por treonina) y a la insulina biosintética (obtenida por biotecnología con ADN recombinante de origen bacteriano o de levadura).
Bibliografía:
Mayo Trujillo, ADN recombinante: Ejemplo de uso de la insulina 2015  https://www.academia.edu/10823987/ADN_Recombinante_Ejemplo_de_uso_de_la_insulina
Insulinotheraphy, Andres Kuzmanic, Rev Med Chile 2009 
Manuel E. Sintesis de analogos a la insulina, Scielo Rev Cubana
Cultek S.L.U. Tecnica del ADN recombinante 

Pruebas Moleculares para la Diabetes Mellitus

Las pruebas moleculares son métodos de laboratorio que permiten identificar alteraciones de proteínas, ciertos metabolitos, cromosomas o ácidos nucleicos relacionados con enfermedades de causa genética. Constituyen técnicas que llegan a revelar las bases moleculares de estas afecciones. 

Los métodos de análisis de mutaciones para el diagnóstico clínico son muy variados y la selección específica de ellos. Como consecuencia, los laboratorios de diagnóstico molecular cuentan actualmente con tests diseñados selectivamente para la diabetes mellitus con base genética, los cuales con gran frecuencia combinan técnicas moleculares (RPC, Southern blot, hibridación con oligonucleótidos mutación-específicos, secuenciación), buscando desarrollar técnicas que sean relativamente simples, confiables, aplicables a escala y de bajo costo.

La prueba mas usual es determinar las variantes genotípicas del SNP -19 del gen de la CAPN 10 y su relación con la diabetes mellitus tipo 2, para esto se le va a necesitar una muestra de sangre, del cual se le extraera el ADN de los linfocitos. 

                                      

Razones de elección de esta prueba:

1) No se necesitan pasos especiales para realizar este examen.
2) Es una prueba que se usa de manera rutinaria en algunos centros de salud o laboratorios 
3) Es especifico para el gen a determinar, en nuestro caso CAPN 10
4) Sus muestras biológicas son de facil acceso como sangre periferica.
5) La obtención de resultados por pcr son casi inmediatos 


Bibliografía:

Silvana Zanlungo M, Marco Arrese J, Attilio Rigotti R. Medicina molecular: Presente y futuro Molecular medicine: Present and future Rev. méd. Chile v.127 n.8 Santiago ago. 1999 http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0034-98871999000800014&script=sci_arttext


Ministerio de sanidad Publica, Diagnostico de Diabetes Mellitus,, España  http://www.guiasalud.es/egpc/diabetes_tipo1/completa/apartado04/definicion.html

Estela Morales Peralta Pertinence of the lab techniques for the diagnosis of genetic diseases Rev Cubana Pediatr v.80 n.2 Ciudad de la Habana abr.-jun. 2008  http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-75312008000200010

sábado, 4 de junio de 2016

Prueba de Tamizaje en Diabetes Mellitus


La glucemia en ayunas es la prueba más sencilla para el tamizaje oportunístico de DM en personas asintomáticas que por algún motivo acuden a un servicio de salud.

Exámenes de glucemia:
Glucosa sanguínea en ayuno. Después de un ayuno de aproximadamente 8 horas. Este examen es utilizado para diagnosticar diabetes o pre-diabetes. Pero no es una prueba 100% confirmatoria de diabetes.
Glucosa sanguínea a cualquier hora del día. Esta prueba junto con una serie de síntomas es utilizada para el diagnóstico de diabetes, pero no de pre-diabetes.
Antecedentes familiares.
Se debe tomar en cuenta los síntomas comunes de la diabetes como son: Poliuria, polifagia y polidipsia
A todos estos exámenes hay que considerar a la hemoglobina glucosilada para poder realizar un diagnostico mas preciso de DM.

Diagnostico confirmatorio:

La prueba de oro para el tamizaje de diabetes en estudios, sigue siendo la medición de la glucemia 2 horas post carga de glucosa (PTOG). Es muy importante tener en cuenta que una prueba de tamizaje solo indica una alta probabilidad de tener DM y debe ser confirmada con una prueba diagnóstica.

                                  


Si en esta prueba, el nivel de glucosa está entre 140 y 199 mg/dl dos horas después de haber bebido el líquido, se tiene una forma de prediabetes llamada Intolerancia a la glucosa, lo que significa que existe el riesgo de desarrollar Diabetes tipo 2

Una glucosa de 200 mg/dl o más después de dos horas de haber tomado la solución glucosada, (y tras la realización de otra PTOG positiva realizada otro día), confirma el diagnóstico de Diabetes.



Webgrafía

- Apuntes Medicos, Diagnotico de diabetes Mellitus y otros problemas metabólicos, 2008, http://apuntesmedicos.net/2008/05/27/diagnostico-de-la-diabetes-mellitus-y-otros-problemas-metabolicos-asociados-a-regulacion-alterada-de-la-glucosa/

- Organizaciñon de Diabetes bienestar y salud 2014, Pruebas para detectar la diabetes, http://www.diabetesbienestarysalud.com/2012/07/pruebas-para-detectar-la-diabetes/

- Brent Weius, Mediplus, examenes y chequeos para diagnostico de Diabetes Mellitus 2014 https://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/patientinstructions/000082.htm

- Imagen extraida de: http://kinexpert.bligoo.com/la-diabetes-mellitus-una-amenaza-cronica-para-la-salud